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本产品用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照，或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液，充分去除一抗二抗，可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比，不仅省时省力，而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。

使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜，会导致蛋白信号的减弱。但是，本Western一抗二抗去除液，经过多个抗体的检测试验，通常可以重复利用膜3～5次。使用本试剂只需大约15～20分钟即可实现蛋白膜的重复使用，然后可以进行封闭等后续的Western操作。

• 使用辣根过氧化物酶(HRP)，任何一次封闭都应当使用5%脱脂牛奶，如果使用碱性磷酸酯酶，任何一次封闭都应当使用酪蛋白。
  
• 为取得最佳效果，推荐使用PVDF膜。但硝酸纤维素膜也可以使用本Western一抗二抗去除液。
  
• 使用化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测，例如DAB，NBT/BCIP，不适用于本试剂。
  
• 本Western一抗二抗去除液有轻微腐蚀性，使用时请注意防护。

组分	250mL	1L
Western一抗二抗清除剂(强碱性)	250mL	2×500mL
说明书	1份	1份

保存：室温，有效期一年。

• 在完成Western化学发光检测后，蒸馏水中漂洗5分钟。
  
• 弃蒸馏水，加入适量的Western一抗二抗去除液(强碱性)，至少需把膜完全覆盖。在摇床上漂洗5分钟。
  
• 弃Western一抗二抗去除液(强碱性)，加入蒸馏水漂洗一次。然后再加入足量蒸馏水，在摇床上漂洗5分钟。
  
• 进行封闭(blocking)等Western的后续操作。

百奥莱博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合，同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。

产品货号	YT071	YT072	YT073	YT074
产品名称	Western一抗二抗 清除剂(强碱性)	Western一抗二抗 清除剂(弱碱性)	Western一抗二抗 清除剂(中性)	Western一抗二抗 清除剂(酸性)
pH	强碱性	弱碱性	中性	酸性
对于膜上蛋白的保留效果	好	好	好	好
对于一抗二抗的去除效果	好	好	好	好
去除一抗二抗所需时间	15～20分钟	20～30分钟	20～30分钟	40～80分钟
适用膜的类型	PVDF和NC	PVDF和NC	仅PVDF	PVDF和NC
腐蚀性	强	弱	无	弱

用于普通的Western检测时蛋白膜上一抗二抗的去除可以任选一种去除液。如果是NC膜，即硝酸纤维素膜时，不宜选用YT073。从时间角度考虑，强碱性、弱碱性和中性的去除液所需的时间都比较短，可以优先考虑。从价格因素考虑，强碱性的去除液性价比最高。从安全性考虑，中性的去除液由于没有腐蚀性而表现出更高的安全性。弱碱性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正确操作，并进行适当防护，使用强碱性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
对于特定的抗原和抗体，很难说哪一种Western一抗二抗去除液的效果最好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳时，可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间，同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液，以摸索出最佳的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。
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